Гвендолин Стейси впервые появилась на страницах The Amazing Spider-Man #31 в 1965 году — Питер встретил ее в университете, но сначала не обращал на девушку внимания, потому что все мысли его были лишь о тете Мэй, которая тогда попала в больницу.
Гвен подружилась с Флэшем Томпсоном и Гарри Обзорном, а встречаться с Питером начала только после его расставания с Мэри Джейн после непродолжительных отношений.
В отличие от канона, в фильме Стейси рано узнала о тайной личности Человека-паука и даже помогла ему разработать противоядие от сыворотки Ящера, так как работала интерном в Озкорпе.